①生化测定：垂体生长素可增加肾小管对磷的重吸收而使尿磷，粪磷排出减少，使血磷增高，垂体生长激素影响糖代谢使血糖升高并刺激胰岛素分泌，垂体生长激素分泌过多时可出现糖耐量减退或糖尿病，查空腹及饭后血糖均增高。
②垂体生长激素及靶腺激素测定：用放射免疫法测定血生长激素水平显示明显增高，空腹值>5mg/ml以下，如有相应的靶腺功能障碍，可分别测血中性腺、甲状腺、肾上腺皮质激素等以判断。
③垂体功能试验——生长激素抑制试验。由于高血糖可抑制生长激素的释放，因此可做葡萄糖生长激素抑制试验判断有无生长激素分泌亢进。正常人口服100g葡萄糖后血生长激素可抑制到3mg/ml以下，而巨人症及肢端肥大症病人生长激素不被抑制或反而增高。
④形态学检查。可做头颅侧位片，蝶鞍断层等常规X线检查以及鞍区CT或核磁共振显象，以确定有无垂体瘤及瘤的大小，部位及压迫情况。
⑤视力视野及眼底检查。可发现垂体瘤有无向鞍上发展，有时亦可能是病变的早期症状。
如患者有上述典型的体征和临床表现，及测定激素、激素调节的血中生化物质水平，定位检查等，则不难诊断巨人症或肢端肥大症。
